中华蜜蜂气味受体AcerOr2基因最佳干扰片段的筛选

发布时间：2025-04-15 02:36

　　 为了筛选出中华蜜蜂气味受体基因AcerOr2最佳干扰效率的序列,以中华蜜蜂气味受体AcerOr2基因为靶标,分别选取3个片段AcerOr2-1(411 bp)、AcerOr2-2(205 bp)和AcerOr2-3(471 bp),并构建相应的dsRNA表达载体,获取dsRNA后进行RNAi试验,通过qPCR和Western从mRNA水平和蛋白水平检测干扰效率。mRNA结果显示,饲喂3个不同的片段AcerOr2-1(411 bp)、AcerOr2-2(205 bp)和AcerOr2-3(471 bp)对AcerOr2表达量均会产生抑制作用,抑制率分别为69.72%±0.49%、47.26%±0.25%、73.17%±0.97%,抑制率最佳的是471 bp的dsRNA AcerOr2-3。Western Blot结果显示,饲喂3个大小不同的干扰片段后AcerOr2蛋白的表达量均受到显著抑制。试验成功构建AcerOr2基因干扰载体,最终确定471 bp的dsRNA AcerOr2-3为最佳干扰片段,证实其能有效抑制目的基因mRNA和蛋白的表达。研究结果可为进一步应用RNAi技术研究该基因的...

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【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 材料
        1.1.1 供试蜜蜂
        1.1.2 主要试剂、菌株、质粒
    1.2 方法
        1.2.1 AcerOr2基因dsRNA的合成
        1.2.2 中华蜜蜂饲喂dsRNA试验
        1.2.3 RNA干扰效果检测
            1.2.3. 1 qPCR检测干扰效果
            1.2.3. 2 蛋白质印迹检测干扰效果
    1.3 数据处理
2 结果与分析
    2.1 dsRNA模板合成检测
    2.2 体外合成的dsRNA检测
    2.3 最佳干扰片段筛选
3 结论与讨论



本文编号：4039936